【公開日：2023.08.01】【最終更新日：2023.05.26】
課題データ / Project Data
課題番号 / Project Issue Number
22KU0042
利用課題名 / Title
ウルトラミクロトームによる試料作製及びTEM観察
利用した実施機関 / Support Institute
九州大学 / Kyushu Univ.
機関外・機関内の利用 / External or Internal Use
外部利用/External Use
技術領域 / Technology Area
【横断技術領域 / Cross-Technology Area】（主 / Main）計測・分析/Advanced Characterization（副 / Sub）-
【重要技術領域 / Important Technology Area】（主 / Main）マルチマテリアル化技術・次世代高分子マテリアル/Multi-material technologies / Next-generation high-molecular materials（副 / Sub）次世代バイオマテリアル/Next-generation biomaterials
キーワード / Keywords
ウルトラミクロトームUltracut-UCT,電子顕微鏡/Electron microscopy
利用者と利用形態 / User and Support Type
利用者名（課題申請者）/ User Name (Project Applicant)
松延 祥平
所属名 / Affiliation
横浜市立大学 医学部 看護学科
共同利用者氏名 / Names of Collaborators in Other Institutes Than Hub and Spoke Institutes
ARIM実施機関支援担当者 / Names of Collaborators in The Hub and Spoke Institutes
福永 裕美
利用形態 / Support Type
（主 / Main）技術補助/Technical Assistance（副 / Sub）-
利用した主な設備 / Equipment Used in This Project
報告書データ / Report
概要（目的・用途・実施内容）/ Abstract (Aim, Use Applications and Contents)
薬剤暴露マウスの皮膚組織の観察に向けての実験技術検討
実験 / Experimental
ウルトラミクロトーム（Leica Ultracut-UCT）によるカタツムリ組織及びナメクジ組織包埋ブロックの超薄切作製、それら超薄切片サンプルの透過型電子顕微鏡による観察（TEM, JEM-2100HC）を行った。超薄切は70μmの厚さで行い、切片を親水化処理したグリッドに回収した。回収した切片をEMステイナー及びクエン酸鉛で電子染色し、一晩デシケーターで乾燥させた。翌日、TEMにサンプルグリッドをセットし、100kVで観察を行った。
結果と考察 / Results and Discussion
ウルトラミクロトームにより、70μm厚の連続切片を取得した。超薄切に先立つ精密トリミングは、片刃剃刀とガラスナイフで行った。比較すると、ガラスナイフで行った方が、面合わせなどの時間は要するが、断面を鏡面かつ正確にトリミングできることが分かった。マウスの皮膚組織は、光学顕微鏡観察用のパラフィン包埋切片の厚さにおいても破損しやすいので、樹脂包埋ブロックの精密トリミングはガラスナイフで行う方が良いと考えられる。また、電子顕微鏡観察では、核やミトコンドリアなどの細胞小器官を観察できた。マウス皮膚組織の観察では、脂肪細胞にも注目するので、固定、脱水、電子染色、そして加速電圧等の条件を検討し、今後、脂肪細胞の分化や脂肪滴の大きさや数等を調べていく。
図・表・数式 / Figures, Tables and Equations
その他・特記事項（参考文献・謝辞等） / Remarks(References and Acknowledgements)
実験準備及び技術支援をして頂きました九州大学超顕微解析研究センター 学術研究員 福永裕美 様ならびにセンターの皆様に感謝申し上げます。
成果発表・成果利用 / Publication and Patents
論文・プロシーディング（DOIのあるもの） / DOI (Publication and Proceedings)
口頭発表、ポスター発表および、その他の論文 / Oral Presentations etc.
特許 / Patents
特許出願件数 / Number of Patent Applications：0件
特許登録件数 / Number of Registered Patents：0件