【公開日：2024.07.25】【最終更新日：2024.06.22】
課題データ / Project Data
課題番号 / Project Issue Number
23NU0004
利用課題名 / Title
マラリア原虫のアシル転移酵素（PfLPLAT1）欠損による核分裂阻害メカニズムの解析
利用した実施機関 / Support Institute
名古屋大学 / Nagoya Univ.
機関外・機関内の利用 / External or Internal Use
外部利用/External Use
技術領域 / Technology Area
【横断技術領域 / Cross-Technology Area】（主 / Main）計測・分析/Advanced Characterization（副 / Sub）-
【重要技術領域 / Important Technology Area】（主 / Main）次世代バイオマテリアル/Next-generation biomaterials（副 / Sub）-
キーワード / Keywords
電子顕微鏡/ Electronic microscope,生体イメージング/ In vivo imaging
利用者と利用形態 / User and Support Type
利用者名（課題申請者）/ User Name (Project Applicant)
福本 隼平
所属名 / Affiliation
長崎大学熱帯医学研究所
共同利用者氏名 / Names of Collaborators in Other Institutes Than Hub and Spoke Institutes
早川枝李,臼倉次郎
ARIM実施機関支援担当者 / Names of Collaborators in The Hub and Spoke Institutes
荒井重勇,依田香保留,中尾知代,樋口公孝
利用形態 / Support Type
（主 / Main）技術代行/Technology Substitution（副 / Sub）-
利用した主な設備 / Equipment Used in This Project
報告書データ / Report
概要（目的・用途・実施内容）/ Abstract (Aim, Use Applications and Contents)
アシル転移酵素は、アシル鎖を1本だけもつリン脂質（リゾリン脂質）にもう一本アシル鎖を導入する酵素で、哺乳類では10種類以上同定されている。しかしマラリア原虫では、データベース上で数個見つかるが、その機能は不明のままである。そのうちの1つをコンディショナルノックアウトしたところ、24時間以内にステージ分化（トロフォゾイト期⇒シゾント期）が停止し、原虫が死滅した。このステージ分化プロセスはシゾゴニーと呼ばれ、核分裂（一つの核が最終的に数十個に分裂）とそれにともなう膜陥入がおこる。蛍光観察ではノックアウトした原虫では核の分裂が起こっていないまま死滅した結果が得られたため、分化プロセスの停止に関して構造的な詳細データを得たい。
実験 / Experimental
熱帯熱マラリア原虫（GL, wild type）、およびコンディショナルノックアウト（CKU）株感染赤血球のスカイゾント期を分離して集めて、電子顕微鏡用の樹脂包埋したのち、超高圧電顕観察用の厚さに合わせてミクロトームによる切片を作成。酢酸ウラン＋クエン酸鉛染色したのち、電顕観察をおこなった。
結果と考察 / Results and Discussion
蛍光観察ではノックアウトした原虫では核の分裂が起こっていないまま死滅した結果が得られたため、分化プロセスの停止に関して構造的な詳細データを得たいため、熱帯熱マラリア原虫（GL, wild type）、およびコンディショナルノックアウト（CKU）株感染赤血球のスカイゾント期を分離して集めて、電子顕微鏡用の樹脂包埋したのち、超高圧電顕観察用の厚さに合わせてミクロトームにて切片を作成。酢酸ウラン＋クエン酸鉛染色したのち、反応科学超高圧電子顕微鏡にて観察を行い、画像を得た。その後、titingした画像を用いた3Dイメージ動画を得たいため、継続して観察を行う。
図・表・数式 / Figures, Tables and Equations
その他・特記事項（参考文献・謝辞等） / Remarks(References and Acknowledgements)
成果発表・成果利用 / Publication and Patents
論文・プロシーディング（DOIのあるもの） / DOI (Publication and Proceedings)
口頭発表、ポスター発表および、その他の論文 / Oral Presentations etc.
特許 / Patents
特許出願件数 / Number of Patent Applications：0件
特許登録件数 / Number of Registered Patents：0件