【公開日：2024.07.25】【最終更新日：2024.05.22】
課題データ / Project Data
課題番号 / Project Issue Number
23NM0018
利用課題名 / Title
質量分析による核内タンパクの翻訳後修飾の解析
利用した実施機関 / Support Institute
物質・材料研究機構 / NIMS
機関外・機関内の利用 / External or Internal Use
外部利用/External Use
技術領域 / Technology Area
【横断技術領域 / Cross-Technology Area】（主 / Main）物質・材料合成プロセス/Molecule & Material Synthesis（副 / Sub）-
【重要技術領域 / Important Technology Area】（主 / Main）次世代バイオマテリアル/Next-generation biomaterials（副 / Sub）-
キーワード / Keywords
生体組織,質量分析/ Mass spectrometry
利用者と利用形態 / User and Support Type
利用者名（課題申請者）/ User Name (Project Applicant)
矢作 直也
所属名 / Affiliation
自治医科大学医学医療系
共同利用者氏名 / Names of Collaborators in Other Institutes Than Hub and Spoke Institutes
武内謙憲
ARIM実施機関支援担当者 / Names of Collaborators in The Hub and Spoke Institutes
服部晋也
利用形態 / Support Type
（主 / Main）機器利用/Equipment Utilization（副 / Sub）-
利用した主な設備 / Equipment Used in This Project
報告書データ / Report
概要（目的・用途・実施内容）/ Abstract (Aim, Use Applications and Contents)
マウスの肝臓の核内タンパク質にどのような翻訳後修飾が生じているかを明らかにする目的で、超遠心法ならびに免疫沈降とSDS-PAGEにより分取した核内タンパク質を用いて質量分析(LC-MS/MS)による分子修飾の検出を行う。
実験 / Experimental
Zaprous ADV Q-Exactive systemを使用して、核内タンパク質の分子修飾の検出を試みた。
結果と考察 / Results and Discussion
現在まだ実験が進行中であり、確定的な結果は得られていないが、目的とするタンパク質の検出率自体が想定をかなり下回っているため、装置にアプライするタンパク質量を増やす方向性で検討を重ねている。また、カバー率を向上させるためにトリプシン以外のタンパク分解酵素によるin-gel digestionの併用も試みた。さらにトリプシン切断部位に人工的な変異を入れることでカバー率向上を目指した。
図・表・数式 / Figures, Tables and Equations
その他・特記事項（参考文献・謝辞等） / Remarks(References and Acknowledgements)
成果発表・成果利用 / Publication and Patents
論文・プロシーディング（DOIのあるもの） / DOI (Publication and Proceedings)
口頭発表、ポスター発表および、その他の論文 / Oral Presentations etc.
特許 / Patents
特許出願件数 / Number of Patent Applications：0件
特許登録件数 / Number of Registered Patents：0件