【公開日：2024.07.25】【最終更新日：2024.04.11】
課題データ / Project Data
課題番号 / Project Issue Number
23NM5280
利用課題名 / Title
生体由来微粒子の構造・相互作用に関する研究
利用した実施機関 / Support Institute
物質・材料研究機構 / NIMS
機関外・機関内の利用 / External or Internal Use
内部利用（ARIM事業参画者以外）/Internal Use (by non ARIM members)
技術領域 / Technology Area
【横断技術領域 / Cross-Technology Area】（主 / Main）計測・分析/Advanced Characterization（副 / Sub）-
【重要技術領域 / Important Technology Area】（主 / Main）マテリアルの高度循環のための技術/Advanced materials recycling technologies（副 / Sub）次世代バイオマテリアル/Next-generation biomaterials
キーワード / Keywords
生体ナノ粒子,電子顕微鏡/ Electronic microscope
利用者と利用形態 / User and Support Type
利用者名（課題申請者）/ User Name (Project Applicant)
岡本 章玄
所属名 / Affiliation
物質・材料研究機構
共同利用者氏名 / Names of Collaborators in Other Institutes Than Hub and Spoke Institutes
高野 壮太朗,厳 康敏
ARIM実施機関支援担当者 / Names of Collaborators in The Hub and Spoke Institutes
鴻田 一絵,長谷川 明
利用形態 / Support Type
（主 / Main）機器利用/Equipment Utilization（副 / Sub）,技術補助/Technical Assistance
利用した主な設備 / Equipment Used in This Project
報告書データ / Report
概要（目的・用途・実施内容）/ Abstract (Aim, Use Applications and Contents)
細菌由来膜小胞は、ヒト体内に存在する直径約100〜300 nm程度の微粒子であり、各種疾患を媒介する因子の一つとして注目を集めている。近年これらの微粒子を疾患診断や生菌製剤に役立てようとする研究が盛んになりつつあるが、ヒト体液中から細菌膜小胞のみを効率的に精製する技術については、未だ確立されておらず、当グループで技術開発を進めている。現在、様々な精製手法を検討しているが、サンプルの精製純度の評価を行うにあたって、試料中の微粒子の形状を直接的に観察する必要がある。そこで、試料中に存在するナノ粒子のサイズ形状を、電子顕微鏡（TEM）を用いて観察した。
実験 / Experimental
初めに、観察対象となる試料を、超遠心法やサイズ排除クロマトグラフィー法などを用いてヒト体液等から分離・精製し、得られたサンプルに対してネガティブ染色を実施した上で、TEMを用いた観察を行なった。各手法間で、サンプル中に含まれる微粒子の形態、大きさを比較することで、精製後の細菌膜小胞の形態や夾雑物の有無を確認した。
結果と考察 / Results and Discussion
観察の結果、密度勾配遠心法やサイズ排除クロマトグラフィーの各手法について、目的とする微粒子が最も多く観察されるフラクションを同定することに成功した。また、像が鮮明に見えやすい、加速電圧、染色条件についても明らかになったため、今後は同条件において観察を進めていく予定である。
図・表・数式 / Figures, Tables and Equations
精製した微粒子の一例。ネガティブ染色後にTEMによる観察を実施した。
その他・特記事項（参考文献・謝辞等） / Remarks(References and Acknowledgements)
成果発表・成果利用 / Publication and Patents
論文・プロシーディング（DOIのあるもの） / DOI (Publication and Proceedings)
口頭発表、ポスター発表および、その他の論文 / Oral Presentations etc.
特許 / Patents
特許出願件数 / Number of Patent Applications：0件
特許登録件数 / Number of Registered Patents：0件