【公開日：2024.07.25】【最終更新日：2024.04.02】
課題データ / Project Data
課題番号 / Project Issue Number
23HK0077
利用課題名 / Title
高感度に定量可能な革新的ウイルス様粒子を用いた培養困難なノロウイルスの浄水処理性評価
利用した実施機関 / Support Institute
北海道大学
機関外・機関内の利用 / External or Internal Use
内部利用（ARIM事業参画者以外）/Internal Use (by non ARIM members)
技術領域 / Technology Area
【横断技術領域 / Cross-Technology Area】（主 / Main）計測・分析/Advanced Characterization（副 / Sub）-
【重要技術領域 / Important Technology Area】（主 / Main）マテリアルの高度循環のための技術/Advanced materials recycling technologies（副 / Sub）-
キーワード / Keywords
電子顕微鏡/ Electronic microscope,分離・精製技術/ Separation/purification technology
利用者と利用形態 / User and Support Type
利用者名（課題申請者）/ User Name (Project Applicant)
浅川 高志
所属名 / Affiliation
北海道大学大学院工学院 環境創生工学専攻
共同利用者氏名 / Names of Collaborators in Other Institutes Than Hub and Spoke Institutes
ARIM実施機関支援担当者 / Names of Collaborators in The Hub and Spoke Institutes
森有子,平井直美,松尾保孝
利用形態 / Support Type
（主 / Main）機器利用/Equipment Utilization（副 / Sub）-
利用した主な設備 / Equipment Used in This Project
報告書データ / Report
概要（目的・用途・実施内容）/ Abstract (Aim, Use Applications and Contents)
生体外での培養が困難であることから、浄水処理工程における挙動（除去特性・不活化特性）が明らかになっていないノロウイルスについて、培養法に頼ることなく多量に作製可能なノロウイルス様粒子（表面粒子構造が本物のノロウイルスと同等である中空のウイルス粒子：VLPs）の内部に複数の外来DNAを封入した革新的VLPsを創製し、これを浄水処理実験に用いることにより、これまで解明されてこなかったノロウイルスの浄水処理性を詳細に把握しようとする研究である。
実験 / Experimental
DNA結合金ナノ粒子（DNA-AuNPs）をVLPs内部に封入するため、ジチオトレイトール（DTT）を用いてVLPsの粒子構造を一時的に分解させた。この後、溶液内のDTTを透析にて除去し、予め作製したDNA-AuNPsを添加した。ここに、塩化カルシウムを添加することで、VLPsの粒子構造を再合成させ、走査型透過電子顕微鏡にてVLPs溶液を観察した。
結果と考察 / Results and Discussion
VLPs内部にDNA-AuNPsの封入を試みたところ、DNA-AuNPsが封入されたVLPs（封入VLPs）は観察されなかった。同時に、DNA-AuNPsの凝集体が多く観察された。そこで、この凝集体を分散させるために、親水基の付加によるDNA-AuNPsのコーティングを実施し、再度封入を試みた。その結果、封入VLPsを確認できた。従って、このような方法にて、封入VLPsを作製できることが示された。
図・表・数式 / Figures, Tables and Equations
その他・特記事項（参考文献・謝辞等） / Remarks(References and Acknowledgements)
北海道大学電子科学研究所 松尾保孝教授、森有子様、平井直美様には、走査型透過電子顕微鏡の取り扱いに関してご指導を賜りました。心より感謝致します。
成果発表・成果利用 / Publication and Patents
論文・プロシーディング（DOIのあるもの） / DOI (Publication and Proceedings)
口頭発表、ポスター発表および、その他の論文 / Oral Presentations etc.
特許 / Patents
特許出願件数 / Number of Patent Applications：0件
特許登録件数 / Number of Registered Patents：0件